Teses Defendidas - 2024

Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Patologia Ambiental e Experimental

Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Patologia Ambiental e Experimental da UNIP é nota 5 na CAPES
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Título: Caracterização das alterações comportamentais promovidas pela evolução da neurocriptococose e sua correlação com a expressão encefálica do Gene Gals-3

Autor(a): Rogério Luiz Aires Lima
Orientador(a): Prof. Dr. Rodrigo Augusto da Silva
Data da defesa: 30/01/2024

Resumo: Introdução. A criptococose é uma doença causada pelo criptococos que atingem o pulmão pela inalação dos esporos e têm predileção pelo sistema nervoso central, como forma extra pulmonar. Trata-se de doença grave, que atinge principalmente imunodeprimidos (C. neoformans), mas existe uma forma que atinge os imunocompetentes (C. gattii). A galectina-3 é uma proteína que está no citoplasma, núcleo e espaço extracelular e modula a imunidade inata e adaptativa do hospedeiro e está relacionado à defesa do organismo contra o patógeno. Se a galectina-3 está aumentada, a defesa do organismo consegue eliminar a infecção, mas em situação de imunossupressão, os indivíduos ficam mais susceptíveis ao processo infeccioso, exibindo comportamento doentio. Objetivo. Correlacionar as alterações comportamentais com a alta carga e baixa carga fúngica e com a quantidade de galectina cerebral e pulmonar, juntamente com o marcador astrocitário GFAP e imunomarcação microglial com iba-1, além de avaliar a epigenética associada à Neurocriptococose. Material e métodos. Após um período de adaptação, realizou-se estudos de desenvolvimento e dividiu- se os indivíduos em 7 grupos, sendo: sham, controle, ciclofosfamida, ciclofosfamida e C. gattii, Ciclofosfamida e C. neoformans, C. neoformans e C. gattii. Após dois períodos, um de 7 dias e outro de 14 dias, realizou-se um teste de comportamento, eutanasiou-se os camundongos e foram analisados carga fúngica, histologia e microbiologia, galectina-3, proteína acida fibrilar glial. Resultados: os animais com alta carga e infectados com C. gattii tiveram maior alteração comportamental quando comparados com os outros grupos da pesquisa. Conclusão: Os animais com maior carga fúngica e menor Gal-3 encefálica tiveram maior comprometimento dos testes comportamentais. Independente da carga fúngica (alta ou baixa) houve reatividade glial. Naqueles infectados com C. gattii (imunossuprimidos ou imunocompetentes) tiveram maior comprometimento pulmonar e comportamento doentio exacerbado.

Palavras-chave: Criptococos, estudo comportamental, C. gattii, C. neoformans.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional.

Título: A mutação em camundongos de gene KM2D induz comportamentos compatíveis com modelos animais de transtorno de déficit de atenção e hiperatividade em machos mas não em fêmeas

Autor(a): Loren da Silva Medeiros
Orientador(a): Profa. Dra. Maria Martha Bernatdi
Data da defesa: 27/05/2024

Resumo: O camundongo mutante recessivo bate-palmas BALB/c bapa apresenta mutação no gene Km2d. Em humanos a mutação deste gene está ligada à ocorrência da síndrome de Kabuki. Pacientes com esta síndrome apresentam hiperatividade e impulsividade com sintomas similares ao transtorno de déficit de atenção. Além disso, estudos prévios que caracterizaram o fenótipo deste mutante revelaram, além de outros aspectos, que eles apresentam aumento da atividade geral. Objetivos: Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar se o camundongo bapa apresenta comportamentos compatíveis com hiperatividade, déficit de atenção e impulsividade. Material e Métodos: Foram observados: a atividade geral em campo aberto, comportamentos de autolimpeza, no labirinto em Y, no teste de atenção baseado em objetos, no teste de esquiva de altura de camundongos BALB/c (grupo selvagem-WT) e bapa, machos e fêmeas. A expressão dos receptores da adenosina (ADORA 1 e 2) foi avaliada. Resultados: Em relação aos camundongos WT, os camundongos bapa machos apresentaram: aumento da atividade geral e da limpeza; redução na porcentagem de alternâncias em labirinto em Y e no teste de atenção a objetos, sem modificações no teste de impulsividade e aumento na expressão do receptor ADORA 2. As fêmeas bapa mostraram: redução na atividade geral e na limpeza; aumento nas frequências de alternâncias em labirinto em Y e no teste de atenção a objetos novos, com ausência de comportamento de risco e redução na expressão do receptor ADORA 2. Conclusões: Estes resultados sugerem que a mutação do gene Km2d afetou de forma diferente o comportamento de camundongos machos e fêmeas mutantes, provavelmente por alterações epigenéticas ligadas aos hormônios sexuais.

Palavras-chave: Mutação; N-ethyl-N-nitrosourea; comportamento; epigenética;hiperatividade.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq: Neuropsicofarmacologia Experimental e Ambiental.

Título: Efeitos do cloreto de sódio 30ch na bio-resiliência de artemia franciscana ao stress hiposmótico: Rastreabilidade e expressão de proteínas de choque térmico

Autor(a): Andréia Adelaide Gordinho Pinto
Orientador(a): Profa. Dra. Leoni Villano Bonamin
Data da defesa: 11/06/2024

Resumo: Introdução: Nesse estudo, a Artemia franciscana e o isoterápico de cloreto de sódio foram utilizados como modelos experimentais para avaliação da bio-resiliência de embriões ao stress hiposmótico, com enfoque para a possibilidade de rastreamento do isoterápico na água e a expressão de genes para proteínas de choque térmico (HSPs) como marcadores moleculares. Objetivo: Estudar os mecanismos de biorresiliência de Artemia franciscana ao stress hiposmótico após tratamento com cloreto de sódio (NaCl) 30CH e identificar sua presença na água pelo método de corantes solvatocrômicos. Métodos: Os experimentos foram realizados nas fases da lua cheia e minguante em cego. Utilizadas placas de cultura de 96 poços para observar a eclosão de cistos de Artemia franciscana, imersos em água pura ou água do mar artificial. Em estudo piloto foi feita a padronização do stress hiposmótico e a escolha da potência de NaCl entre 6CH e 200CH. Os controles foram água, água sucussionada, etanol 10% e etanol 10% sucussionado. Cistos expostos à água pura e tratados ou não com NaCl 30CH foram avaliados quanto à taxa de eclosão, vitalidade dos náuplios e expressão de genes-alvo para HSPs. Foi realizado um screening de 6 corantes solvatocrômicos para a seleção de um marcador físico-químico capaz de identificar a presença de NaCl 30CH na água. Dados analisados por ANOVA de duas vias, seguida de Tukey, sendo α<0,05. Resultados: O tratamento dos cistos com NaCl 30CH facilitou a interrupção da eclosão no estágio guarda-chuva e a expressão reduzida dos genes hsp26 e hsp90. Os corantes BDN e Coumarin 7 mostraram ser bons marcadores físico-químicos para o rastreamento do NaCl 30CH e Coumarin 7 foi escolhido para sua identificação na água. Discussão: O fato de os cistos permanecerem em estágio "guarda-chuva" em maior proporção e a menor expressão de p26 e hsp90 após o tratamento com NaCl 30CH sugere facilitação dos processos de interrupção do ciclo de vida dos animais expostos a condições ambientais incompatíveis com a espécie (stress hiposmótico severo), com possível impacto para toda a cadeia trófica em situações de vida real. O NaCl 30CH foi possível de ser rastreado na água pelo corante Coumarin 7. Conclusão: Houve facilitação da interrupção do desenvolvimento embrionário pelo NaCl 30CH em situações de alto risco para a espécie, sendo tal potência homeopática rastreável na água por corantes solvatocrômicos.

Palavras-chave: homeopatia, diapausa, camarão das salmouras, ecotoxicologia, corantes solvatocrômicos.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.